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Evaluation préclinique de nouvelles thérapies sur modèles organotypiques ex-vivo

Sophie LEON

Plateforme Ex Vivo
Centre Léon Bérard-Centre de Recherche en Cancérologie de Lyon
INSERM 1052, CNRS 5286
28 Rue Laënnec
69008 Lyon

L’étude des effets thérapeutiques des médicaments à l’échelle individuelle du patient est un véritable défi en cancérologie. La plateforme Ex Vivo du Centre Léon Bérard et du CRCL a mis en place des tests de sensibilité sur coupes organotypiques de tissus frais. Cette technique permet de maintenir en vie des tissus tumoraux frais pendant plusieurs jours, tout en en conservant leur architecture et leurs interactions cellulaires. En pratique, après exérèse chirurgicale de la pièce opératoire du patient et validation macroscopique des ana-path, un échantillon tumoral frais est prélevé, mis dans un milieu le temps du transfert à la plateforme, puis inclus dans un gel d’agarose. Des coupes épaisses de 250 µm sériées de cette même tumeur sont réalisées à l’aide d’un vibratome et mises en culture pendant 24 à 72 h dans différentes conditions de culture. Le milieu préalablement optimisé selon la pathologie étudiée, permet de comparer différentes molécules thérapeutiques ou différentes doses d’une même molécule par rapport aux conditions contrôles. Plusieurs types d’analyses de tests d’efficacité peuvent être réalisés selon le critère d’efficacité retenu. Des études immuno-histologiques après fixation des coupes sont classiquement réalisées afin d’évaluer l’impact du traitement sur la prolifération et l’apoptose. Nous développons également des panels IF multiplexes pour analyser conjointement la réponse tumorale et son microenvironnement sur une même coupe. Cette approche innovante participe au développement de nouveaux candidats médicaments pour renforcer leur preuve de concept et ouvrir la voie aux essais cliniques.

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