La co-détection des plaquettes et des macrophages dans les tissus est essentielle pour compléter l'investigation histopathologique d'un syndrome d'activation macrophagique suspecté dans le cadre d'études précliniques. Nous présentons ici le développement et la validation d'un workflow histotechnique intégré permettant une double détection immunohistochimique (IHC) plaquettes/macrophages robuste chez les primates non humains (PNH), avec un accent particulier sur la génération de contrôles positifs adaptés à l'usage.
Trois approches de préparation de blocs FFPE (formalin-fixed paraffin-embedded) à partir de suspensions cellulaires ont été comparées : l'inclusion directe de culots cellulaires fixés, l'inclusion en matrice de gel (HistoGel™), et une méthode basée sur des pastilles d’inclusion commerciales (CytoPath™, DiaPath). Sur la base de la qualité de coupe, de la richesse cellulaire, de la préservation morphologique et de la reproductibilité, le protocole optimal a été sélectionné et appliqué à la préparation de blocs FFPE à partir de plaquettes isolées dérivées de PNH.
Ces blocs FFPE enrichis en plaquettes ont servi de contrôles positifs dédiés pour le développement et la validation d’un protocole IHC simplex anti-plaquettes, puis pour l'optimisation d'une méthode de double immunomarquage chromogénique permettant la détection simultanée des plaquettes et des macrophages dans les tissus de PNH.