Les membranes associées aux mitochondries (MAMs) correspondent à des structures de contact spécialisées permettant les échanges et la communication entre le réticulum endoplasmique (RE) et les mitochondries. Elles sont impliquées notamment dans la régulation du métabolisme lipidique et de l’homéostasie calcique. Des altérations des MAMs ont été décrites dans l’obésité et le diabète de type 2, mais leur distribution spatiale au sein du foie reste mal caractérisée.
Nous avons développé une approche histologique de caractérisation spatiale des MAMs hépatiques combinant in situ proximity ligation assay (PLA) et marquages de zonation hépatique sur des coupes de foie de souris soumises à un régime standard ou à un régime riche en graisses et supplémenté en sucrose (HFSD). Les contacts mitochondrie-RE ont été évalués par PLA via les interactions entre VDAC1, localisé sur la membrane mitochondriale externe et IP3R, localisé au niveau du réticulum endoplasmique à l’aide des anticorps anti-VDAC1 (Abcam, ab14734, 1:4000) et anti-IP3R (Abcam, ab5804, 1:8000). La zonation hépatique a été déterminée par immunomarquage de l’E-cadhérine (Bio-Techne, AF748, 1:50, 1 h) pour la zone périportale et de la glutamine synthétase (Proteintech, 11037-2-AP, 1:500, 15 min) pour la zone péricentrale. Les analyses quantitatives ont été réalisées le long de l’axe porto-central à l’aide du logiciel Fiji.
Cette approche permet, pour la première fois, une cartographie spatiale des MAMs selon les différentes zones métaboliques hépatiques. Nous montrons qu’à l’état basal, les contacts mitochondrie-RE sont légèrement diminués dans la zone péricentrale, en accord avec le métabolisme lipidique préférentiellement orienté vers le stockage, tandis que l’altération des MAMsobservée chez les souris HFSD apparaît indépendante de la zonation hépatique.
Ce travail propose ainsi une méthode histologique robuste et reproductible pour l’étude spatiale des interactions mitochondries-RE dans le foie, ouvrant la voie à une meilleure compréhension des altérations des MAMs au cours des maladies métaboliques.