La qualité de la préservation tissulaire détermine la fiabilité de toute analyse histologique. En recherche fondamentale, si l'inclusion en paraffine reste la méthode de référence pour préserver l'architecture tissulaire, la cryoconservation s'impose lorsque la détection d'antigènes labiles, de lipides ou d'activités enzymatiques est requise. Parmi les étapes critiques de la préparation des échantillons congelés, la cryoprotection est déterminante.
La cryoprotection, généralement définie comme la protection des échantillons par leur congélation, correspond dans notre cas à l’imprégnation des tissus par des agents cryoprotecteurs avant congélation. Cette étape limite les dommages liés aux cristaux de glace améliorant la qualité de coupe ; sans elle, des ruptures membranaires, des déformations cellulaires et des artefacts morphologiques peuvent apparaitre.
Le saccharose à 30% est l’agent le plus utilisé, mais son efficacité reste parfois limitée. D’autres approches combinant le diméthylsulfoxyde (DMSO) et le glycérol pourraient être une alternative pour mieux préserver la structure des tissus.
Dans ce contexte, nous avons comparé deux différents protocoles de cryoprotection, à base de saccharose ou de DMSO, sur plusieurs tissus. Selon le tissu, ces protocoles ont été associés à une fixation par perfusion-immersion ou immersion seule. Leur impact a ensuite été évalué par des analyses histologiques et immunohistochimiques, en se focalisant sur la qualité morphologique.
Cette étude vise à identifier les conditions de cryoprotection optimales permettant de limiter les artefacts de congélation et d’améliorer la qualité des analyses histologiques.