Influence des fixateurs et des conditions de conservation avant inclusion sur la morphologie tissulaire et la
préservation des antigènes en immunohistochimie
Julie RIVIERE 1,2, Marthe VILOTTE 1, Maxime PERRIGAULT 3, Emmanuelle DUHEC 3, Stephane LEZMI 3
Le formol tamponné 10% (formaldéhyde4%), fixateur de référence en histopathologie, permet une bonne conservation morphologique et antigénique des tissus. Classé comme cancérogène, il présente des risques pour le personnel exposé. Plusieurs fixateurs alternatifs moins toxiques comme le GAF (glyoxal acid-free) et le Prefix, ainsi que des fixateurs historiques tels que l’AFA (équivalent Davidson), le Carnoy ou le Bouin, possédant des propriétés de fixation et de toxicité différentes ont été testés pour comparer leurs capacités à préserver la morphologie tissulaire et l’antigénicité en immunohistochimie.
Des intestins de souris ont été fixés selon les standards de la toxicologie règlementaire dans diffèrent types de fixateurs (Formol, Préfix, AFA,GAF, Carnoy, Bouin) pendant 24h avant d’être inclus en paraffine. Une partie de ces tissus ont été conservés pendant un mois dans ces fixateurs ou dans une solution diluée de ces mêmes fixateurs (e.g.formol ¼ ou en éthanol 70) avant inclusion. Les tissus ont été coupés et colorés en HE, PAS et immunomarqués pour Ki67 et MUC2.
Les différents fixateurs ont eu des effets différent sassez significatifs sur la préservation de la morphologie tissulaire et la préservation des antigènes à court terme (24h de fixation) et à plus long terme (1mois).
Le formol reste la référence pour la qualité morphologique, la préservation et reproductibilité des IHC réalisées après une fixation de 24h. A plus long terme, une post fixation en Formol ¼ ou éthanol 70% permet de préserver la qualité des immunomarquages.
1Paris-SaclayUniversity, INRAE, AgroParisTech, GABI -78350 Jouy-en-Josas, France
2Paris-SaclayUniversity, INRAE, AgroParisTech, MicalisInstitute -78350Jouy-en-Josas, France
3Excilone, INRAeSite Jouy en Josas, Franc


