La microscopie d’expansion (ExM) est une approche innovante développée depuis 2015 pour surmonter les limites de résolution des microscopes optiques classiques. En incorporant les échantillons biologiques dans un gel de polymères expansible, cette approche permet d’augmenter physiquement la taille des échantillons, révélant ainsi des détails subcellulaires invisibles en microscopie conventionnelle. Le terme ExM regroupe maintenant plusieurs méthodes d’imagerie dont certaines permettent d’atteindre une résolution à l’échelle nanométrique en utilisant des microscopes à fluorescence classiques. Cependant, l’analyse des échantillons expansés est limitée aux couches superficielles en raison de la distance de travail réduite des objectifs à haute résolution, rendant impossible la visualisation de tissus entiers.
Au laboratoire, nous nous intéressons aux modifications post-traductionnelles (MPTs) des microtubules (MTs) au cours de la spermatogenèse chez la drosophile. En analysant la distribution de différentes MPTs par immunomarquage, nous avons constaté que certaines modifications devenaient indétectables sur les axonèmes pendant les derniers stades de maturation des spermatozoides en raison d’un masquage d’épitope. Afin d’analyser à haute résolution la distribution des MPT des MTs qui composent les axonèmes, nous avons combiné plusieurs techniques afin de réaliser la microscopie d’expansion sur des cryo sections de testicules de drosophiles dans le but (1) de démasquer les épitopes et (2) d’obtenir des vues transversales des axonèmes. Notre approche permet d’obtenir des facteurs d’expansion de 9 fois, de démasquer les épitopes inaccessibles en immunomarquage classique, et révèle la structure des axonèmes composés de deux MT centraux entourés de 9 doublets de MTs. Ainsi, notre approche facilite l’analyse des tissus épais en microscopie à haute résolution et devrait être applicable à tout type de cryosections, ouvrant des perspectives prometteuses pour l’étude de structures biologiques complexes dans divers modèles.