Les laboratoires d’anatomie et de cytologie pathologiques (ACP) utilisent diverses techniques conventionnelles comme l’histologie, l’immunohistochimie, la cytologie, la biologie moléculaire et les techniques de cytogénétique, nécessaires pour préciser le diagnostic de certains cancers. Nous nous intéressons ici aux avancées récentes en immunohistochimie (IHC) ou plus particulièrement au multiplexing. En effet cette technique de multiplexing s’est construite sur l’évolution des marquages
immuno-histochimiques (IHC) mais également grâce à l’évolution des automates d’immunohistochimie ainsi que des scanners de lames permettant une acquisition sensible et résolutive. Le principe de l’IHC est de permettre de localiser in situ des protéines, qu’elles soient tissulaires ou cellulaires, au niveau cytoplasmique, membranaire ou nucléaire, spécifique d’une fonction ou d’un type cellulaire. Détectées à l’aide d’anticorps spécifiques elles sont révélées directement sur coupes de tissus, culots cellulaires ou cellules en culture, au moyen de différents systèmes de révélation. Cette méthode sensible à des applications aussi bien en diagnostic qu’en pronostic en mettant en évidence et en caractérisant les cellules potentiellement anormales. Cela peut également aider à identifier les différentes structures d’un prélèvement.
C’est en 1941 que cette technique histologique fût inventée. Depuis, celle-ci n’a cessé d’évoluer avec la mise en place de nouvelles applications plus performantes dans un but de réponse diagnostique plus fiable, plus rapide, tout en économisant les échantillons précieux. Dans cet article, nous présentons le principe, les avantages et les limites d’une des plus récentes méthodes d’immunohistochimie : le multiplexing, qui permet de réaliser jusqu’à 9 marquages sur la même coupe de tissu permettant ainsi d’identifier plusieurs types de cellules. Nous abordons les
différents types de multi-marquage en microscopie à fond clair ou en fluorescence. L’objectif de cet article étant d’aborder les questions pertinentes que l’on doit se poser au moment de vouloir appliquer le multiplexing, comme par exemple comment choisir la technique la plus adaptée et la plus facile à mettre en place, en fonction du type de laboratoire comme de son activité, recherche ou routine.