Coloration Picro Sirius
Bonjour,
Nous réalisons régulièrement des colorations Picro Sirius sur des échantillons, particulièrement sur des foies murins.
Depuis un petit moment, les colorations ne sont pas optimales: coloration rouge des fibres de collagène qui "bave" sur les hépatocytes, coloration orangé des hépatocytes... alors que nous obtenions de jolis résultats auparavant avec le même protocole.
Nous utilisons une solution de Rouge Sirius à 1g/L dans l'acide picrique à 1.2 % (incubation 1h), de l'acide acétique différenciant à 2% (2 bains de 30 sec chacun), séchage des lames puis montage.
Y a -t-il des exigences particulières à ce protocole? Temps de conservation de la solution de PS, concentration de l'acide acétique, incubations,etc.
Je vous remercie pour vos éventuels retours et partages d'expérience.
Bonjour Stéphanie,
Nous avons rencontré également des problèmes de reproductibilité de cette coloration. On a mis en évidence que le lot d'acide picrique était important et que d'un lot à l'autre on n'obtient pas la même qualité de coloration : jaune plutôt orangé et rose/rouge plus faible. Aurélie Covinhes de mon équipe pourra échanger avec toi lors du congrès. Le séchage des lames après l'eau acidifiée est également un facteur important pour éviter que le rose bave sur le jaune. On pourra te transmettre notre protocole si tu le souhaites. Bonne journée