Bonjour,

Une utilisatrice travaillant sur les abeilles souhaite inclure un insecte entier en paraffine et réaliser des lames sériées en débitant l’intégralité du bloc. L’objectif est de mettre en évidence, par immunofluorescence, une cible d’intérêt afin d’en étudier la localisation. Nous travaillons avec des coupes de 3µm d'épaisseur.

Nous avons déjà testé une fixation à la PFA 4 % associée à de l’acide nitrique 8 % pendant 8 jours à température ambiante. Afin de favoriser la pénétration du fixateur, l’abdomen a été perforé et les ailes ainsi que les pattes ont été retirées. Cependant, les résultats ne sont pas concluants: les blocs obtenus sont très difficiles à couper, avec de nombreuses déchirures et la présence de trous.

Auriez-vous des conseils, protocoles ou retours d’expérience concernant la préparation d’échantillons d’abeilles pour une inclusion en paraffine, et en particulier des méthodes permettant de ramollir efficacement la cuticule tout en préservant l’antigénicité ?

Bonjour,

Je rencontre actuellement un problème d’étalement sur des dents de souris. Malgré plusieurs adaptations (changement de couteaux, ajustement de l’angle de coupe, utilisation de scotch, étalement prolongé, différents types de lames, coloration à plat), la dentine finit systématiquement par se décoller de la lame lors de la HE, au moment de la réhydratation.

À la différence d’autres dents que j’ai déjà coupées et étalés sans difficulté, celles-ci ont été passées à l’autoclave avant leur implantation chez la souris. Pensez-vous que cette étape ait pu altérer ou dénaturer la dentine au point d’affecter son adhérence à la lame ?

Merci d’avance pour vos retours et conseils.