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Techniques histologiques

Public·41 membres

Stéphanie BlandinStéphanie Blandin
Stéphanie Blandin

Double marquage chromogénie/fluo

Bonjour,

Une utilisatrice de la plateforme me questionne sur une problématique dont je n'ai pas l'expérience. Elle souhaiterait utiliser des lames déjà immunomarquées en DAB pour réaliser un second marquage colocalisé en fluo. Le précipité marron de la DAB est-il gênant pour mettre en évidence le marquage fluo distinctement?

Je lui ai proposé de vérifier l'éventuelle autofluorence de la DAB et d'utiliser dans ce cas un fluorochrome qui émet en dehors de l'intervalle de longueurs d'onde d'émission éventuelle de la DAB.

Avez-vous déjà été confronté à cette problématique?

Merci pour votre retour!

Stéphanie.

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Cécile COUDY GANDILHONCécile COUDY GANDILHON
Cécile COUDY GANDILHON

programme inclusion muscle

Bonjour à tous, je souhaite inclure des muscles de souris (soleus), est ce que quelqu'un pourrait m'envoyer son protocole utilisé sur l'automate d'inclusion. Merci

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Cécile COUDY GANDILHONCécile COUDY GANDILHON
Cécile COUDY GANDILHON

Programme automate foie et rate

Bonjour à tous,

Je suis à la recherche de personnes travaillant sur le foie et/ou la rate et ayant un programme d'automate d'inclusion en paraffine spécifique de ces organes, permettant ainsi un bon maintien des structures et une coupe facile. J'ai essayé des programmes standards et les résultats ne sont pas optimaux.

Merci pour votre aide

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Unknown member
May 06

Bonjour Cécile,

Au moment de la coupe au microtome, je dégrossi le bloc puis le laisse sur la plaque froide "à l'envers" : face prélèvement vers le plafond (le temps de dégrossir les autres), puis coupe assez lentement.

Bonne soirée

Florence

Sandrine CHENESSEAUSandrine CHENESSEAU
Sandrine CHENESSEAU

Coupes de bois non inclues

Bonjour,

J'ai effectué des coupes de bois au microtome. Ces coupes ne sont pas inclues dans la paraffine (elles font 16um). Je souhaitais les colorer mais mon problème est d'arriver à les faire tenir sur les lames.

J'ai des lames superfrost classique que lesquelles j'ai mis de l'albumine mais dès que je mets les lames dans les cuves, elles se décollent. On a essayé une lame superfrost plus poly-lysine, idem elles ne tiennent pas. Quelqu'un saurait comment faire tenir des coupes de bois non paraffinées sur des lames pour les colorer dans les cuves ? Je vous remercie


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Unknown member
Apr 14

bonjour Sandrine, En fait il te faut colorer tes coupes avant de les déposer au pinceau sur tes lames. Mais si c'est la structure ( l'anatomie) qui t’intéresse, c'est délicat car cela occasionne beaucoup de manipulations manuelles. je faisais sur des lames normales avec des coupes à 20µm. la grande difficulté étaient de les manipuler souvent et d'agir dessus pour bien les étaler sur la lame. De plus c'est très échantillons dépendant( variété dépendantes, ( bois dur bois tendre résineux feuillus ) l'âge. du coup j'ai arrêté cette technique là, car avec de l'analyse d'image derrière j'avais trop d'effet lié à la technique. Aujourd'hui je travail sur l'inclusion en paraffine. travail plus homogène. Olivier

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