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Techniques histologiques

Public·40 membres

Cécile COUDY GANDILHONCécile COUDY GANDILHON
Cécile COUDY GANDILHON

programme inclusion muscle

Bonjour à tous, je souhaite inclure des muscles de souris (soleus), est ce que quelqu'un pourrait m'envoyer son protocole utilisé sur l'automate d'inclusion. Merci

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Cécile COUDY GANDILHONCécile COUDY GANDILHON
Cécile COUDY GANDILHON

Programme automate foie et rate

Bonjour à tous,

Je suis à la recherche de personnes travaillant sur le foie et/ou la rate et ayant un programme d'automate d'inclusion en paraffine spécifique de ces organes, permettant ainsi un bon maintien des structures et une coupe facile. J'ai essayé des programmes standards et les résultats ne sont pas optimaux.

Merci pour votre aide

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Miembro desconocido
06 may

Bonjour Cécile,

Au moment de la coupe au microtome, je dégrossi le bloc puis le laisse sur la plaque froide "à l'envers" : face prélèvement vers le plafond (le temps de dégrossir les autres), puis coupe assez lentement.

Bonne soirée

Florence

Sandrine CHENESSEAUSandrine CHENESSEAU
Sandrine CHENESSEAU

Coupes de bois non inclues

Bonjour,

J'ai effectué des coupes de bois au microtome. Ces coupes ne sont pas inclues dans la paraffine (elles font 16um). Je souhaitais les colorer mais mon problème est d'arriver à les faire tenir sur les lames.

J'ai des lames superfrost classique que lesquelles j'ai mis de l'albumine mais dès que je mets les lames dans les cuves, elles se décollent. On a essayé une lame superfrost plus poly-lysine, idem elles ne tiennent pas. Quelqu'un saurait comment faire tenir des coupes de bois non paraffinées sur des lames pour les colorer dans les cuves ? Je vous remercie


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Miembro desconocido
14 abr

bonjour Sandrine, En fait il te faut colorer tes coupes avant de les déposer au pinceau sur tes lames. Mais si c'est la structure ( l'anatomie) qui t’intéresse, c'est délicat car cela occasionne beaucoup de manipulations manuelles. je faisais sur des lames normales avec des coupes à 20µm. la grande difficulté étaient de les manipuler souvent et d'agir dessus pour bien les étaler sur la lame. De plus c'est très échantillons dépendant( variété dépendantes, ( bois dur bois tendre résineux feuillus ) l'âge. du coup j'ai arrêté cette technique là, car avec de l'analyse d'image derrière j'avais trop d'effet lié à la technique. Aujourd'hui je travail sur l'inclusion en paraffine. travail plus homogène. Olivier

samantha delmondsamantha delmond
samantha delmond

Décalcification dent

Bonjour à tout le groupe,


Je suis à la recherche d'un protocole de décalcification dentaire avec un bon compromis durée/qualité histo ... (pour HE et IHC).

Merci par avance de vos retours,

Bonne journée,


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Miembro desconocido
25 feb

bonjour samantha

j ai deja demineralise une molaire de souris pour la transpariser (clearing) et l imager au lightsheet, et faire la reconstruction 3D, ainsi que des pattes de souris.arthrosique. voila le protocole que j ai utilise avec la ref dont est issu le protocole, mais je n ai pas coupe la dent, j ai image directement apres la transparisation.

Déminéralisation : dents, os

Décalcifiant :

25 ml de la solution mère 0.5M EDTA à pH 8 + 5 ml de PBS 10X sans Ca2+ sans Mg2+

puis ajuster le volume à 50 ml avec de l’eau distillee sterile.

 Immerger l echantillon dans 10 fois son volume de décalcifant. Incuber à 42°C dans un four a hybrider sous agitation douce.

 

Ref : A Method for Rapid Demineralization of Teeth and Bones

Andrew Cho et al The Open Dentistry Journal, 2010, 4, 223-229 223


l article est tres detaillé et merite lecture.

Amicalement

Brigitte delhomme (SPPIN CNRS UME8003)




 


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