Double marquage chromogénie/fluo
Bonjour,
Une utilisatrice de la plateforme me questionne sur une problématique dont je n'ai pas l'expérience. Elle souhaiterait utiliser des lames déjà immunomarquées en DAB pour réaliser un second marquage colocalisé en fluo. Le précipité marron de la DAB est-il gênant pour mettre en évidence le marquage fluo distinctement?
Je lui ai proposé de vérifier l'éventuelle autofluorence de la DAB et d'utiliser dans ce cas un fluorochrome qui émet en dehors de l'intervalle de longueurs d'onde d'émission éventuelle de la DAB.
Avez-vous déjà été confronté à cette problématique?
Merci pour votre retour!
Stéphanie.




Bonjour Cécile,
Au moment de la coupe au microtome, je dégrossi le bloc puis le laisse sur la plaque froide "à l'envers" : face prélèvement vers le plafond (le temps de dégrossir les autres), puis coupe assez lentement.
Bonne soirée
Florence