Validation d’anticorps recombinants en histologie : une alternative éthique sans compromis sur la qualité scientifique
2026, Revue française d'histotechnologie, vol: 38, n°:1, p 91-119
DEMY Doris Lou 1,2*, PIROT Nelly 3,4*, BROYON Morgane 3,4, LE BERT Marc 1,5, GOMEZ Susana 1,2, LEGRAND Véronique 1,2, DORSCHNER Stéphane 1,6, SOTIROPOULOS Athanassia 1,2,7#, BENCSIK Anna 8 #
DOI :

1 GIS FC3R, École nationale vétérinaire d’Alfort, Maisons-Alfort, France
2 Inserm : Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, Paris, France
3 IRCM, Univ. Montpellier, ICM, INSERM, Montpellier, France
4 BCM, Univ. Montpellier, CNRS, INSERM, Montpellier, France
5 CNRS, UMR7355, Orléans - France
6 CEA, France
7 U1016, Institut Cochin, Paris - France
8 Université Lyon 1, Anses Laboratoire de Lyon, Lyon, France
*co-premiers auteurs
#co-derniers auteurs
Résumé :
L’utilisation d’anticorps produits chez des animaux reste très courante en recherche - notamment en histotechnologie - en dépit d’enjeux éthiques majeurs (grand nombre d’animaux, procédures potentiellement douloureuses) et des limites scientifiques bien documentées (comme par exemple la variabilité entre lots, le manque de reproductibilité). Des alternatives recombinantes, produites in vitro à partir de séquences connues, offrent pourtant aujourd’hui des solutions plus fiables, plus éthiques, et à terme, plus économiques. C’est pourquoi des comités européen (EURL ECVAM laboratoire de référence européen pour les alternatives aux tests animaux) et français (CNREEA, comité national de réflexion éthique sur l’expérimentation animale) préconisent, depuis 2020, la transition vers ces anticorps recombinants chaque fois que cela est possible.
Dans ce contexte, le Centre Français pour les 3R (FC3R) a pour mission de promouvoir la mise en œuvre du principe des 3R (Remplacer, Réduire, Raffiner l’expérimentation animale) en soutenant une recherche responsable et innovante, l’éducation et une communication transparente. Afin d’accompagner les acteurs de la recherche dans une transition visant à remplacer l'utilisation d’anticorps d'origine animale par des anticorps recombinants produits in vitro, le FC3R a engagé une étude en collaboration avec l'Association Française d'Histotechnologie (AFH) mobilisant des plateformes d'histologie françaises.
La première phase de ce travail, conduite en partenariat avec l’AFH, a consisté à élaborer et diffuser un questionnaire à destination des plateformes d’histologie françaises, afin d’identifier les anticorps les plus couramment utilisés ainsi que leurs conditions d’utilisation. Douze plateformes ont répondu à cette enquête, listant 36 anticorps « à remplacer ». Parmi eux, 61 % étaient polyclonaux, particulièrement problématiques en termes de reproductibilité et d'impact éthique, et 25 % monoclonaux, certains produits par liquide d’ascite, une méthode reconnue comme sévère pour les animaux. De manière notable, 5 anticorps listés étaient déjà recombinants, révélant un manque de visibilité de cette qualité et soulignant la nécessité d'une meilleure transparence dans la communication et l'étiquetage des anticorps recombinants, y compris par les fournisseurs.
Depuis fin 2024, une étude pilote est menée au sein de plateformes issues de l’enquête afin de comparer les performances des anticorps usuels polyclonaux et monoclonaux avec leurs équivalents recombinants. Financée par le FC3R, elle couvre l’acquisition des anticorps recombinants ainsi que les prestations techniques des plateformes. Les premiers résultats sont très encourageants : des alternatives recombinantes efficaces ont été identifiées pour la détection de CD3, CD31, GFAP, GFP, CHGA, Occludine, KRT14 et Ki67. Dans le présent article à travers l’exemple d’études comparatives des anticorps Abcam et CST anti-GFP, nous illustrons la démarche et les résultats. L’ensemble des résultats sera largement diffusé, notamment sur le site web du FC3R et le réseau de l’AFH, afin de sensibiliser la communauté et d’accompagner la transition vers des pratiques plus robustes et plus responsables sur le plan éthique.
Mots-clés :
Anticorps, Histologie, Immunomarquages, Production in vitro, Recombinant, Remplacer, Reproductibilité, 3R.
English title :
Validation of recombinant antibodies in histology: an ethical alternative without compromising scientific quality
Abstract :
The use of animal-derived antibodies remains widespread in research – including in histotechnology – despite well-documented ethical concerns (e.g., the use of large numbers of animals, painful procedures) and limitations in scientific robustness (such as batch to batch variability and lack of reproducibility). In
contrast, recombinant antibodies, produced in vitro from defined sequences, provide more reliable, ethically sound, and ultimately, more cost-effective alternatives. Consequently, since 2020, both European (EURL ECVAM, the European Reference Laboratory for Alternatives to Animal Testing) and French (CNREEA, the National Committee for Ethical Reflection on Animal Experimentation) committees have advocated a transition towards the use of these recombinant antibodies whenever feasible.
The French Centre for the 3Rs (FC3R) seeks to promote and implement the 3Rs principle (Replacement, Reduction, Refinement of animal testing) in France by fostering responsible and innovative research, education and transparent communication. To support researchers in the transition from using animal derived antibodies to in vitro- produced ‘recombinant’ alternatives, the FC3R has launched, in collaboration with the French Association of Histotechnology (AFH), a study involving a network of French histology platforms.
The first phase of this study was conducted in partnership with the AFH and involved the development and dissemination of a survey targeting French histology platforms. The aim was to identify the antibodies most commonly used, as well as the conditions under which they are employed. A total of twelve platforms responded, reporting 36 antibodies considered ‘to be replaced’. Among these, 61 % were polyclonal and 25 % monoclonal, some of which are produced using ascites fluid, a severe procedure associated with significant animal suffering. Interestingly, five of the antibodies identified were already recombinant, highlighting the need for improved transparency in the communication and labeling of recombinant antibodies, including by suppliers.
Since late 2024, a pilot study has been underway at sites selected from the survey with the aim of comparing the performance of usual polyclonal and monoclonal antibodies to that of their recombinant counterparts. Funded by the FC3R, this initiative covers both the procurement of recombinant antibodies and the technical services provided by the participating platforms. The preliminary results are highly encouraging: effective recombinant alternatives have been successfully identified for the detection of CD3, CD31, GFAP, GFP, CHGA, Occludin, KRT14 and Ki67. In this article, comparative analyses of antiGFP antibodies from Abcam and CST are presented as a case study to illustrate both the methodology and the outcomes. The complete set of results will be widely disseminated, particularly via the FC3R website and the AFH network, in order to raise awareness within the scientific community and to support the transition toward more robust and ethically responsible practices.
Keywords :
Antibodies, Histology, Immunostaining, In vitro production, Recombinant, Replace Reproducibility, 3Rs.
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Comment citer cet article (How to cite this article) :
DEMY Doris Lou 1,2*, PIROT Nelly 3,4*, BROYON Morgane 3,4, LE BERT Marc 1,5, GOMEZ Susana 1,2, LEGRAND Véronique 1,2, DORSCHNER Stéphane 1,6, SOTIROPOULOS Athanassia 1,2,7#, BENCSIK Anna 8 # 2026, validation d’anticorps recombinants en histologie : une alternative éthique sans compromis sur la qualité scientifique, Revue française d'histotechnogie, vol: 38, n° 1, p: 91-119
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