Fixation coupes congelées
Bonjour,
Je souhaiterais réaliser de l'IHC en fluo sur des cerveaux de souris en OCT.
Cependant, plusieurs protocoles indiquent une fixation du tissus avant congélation ou des lames après la coupe au cryostat. Auriez-vous déjà essayé sur des coupes de tissus directement congèles après prélèvement et sans fixation de la lame avant le marquage?
De plus faites vous des bains de sucrose dans ce cas la ?
En vous remerciant
Belle journée à tous
Julie
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Bonjour Julie, nous avons déjà fait des immunos sur des coupes congelées de tissus non fixés et sur des coupes congelées non-fixées avant immuno. Il faut faire des temps courts d'incubation à température ambiante (15-30 min), ou mettre de l'azide dans les réactifs si votre marquage est un peu succeptible. Par contre n'oubliez pas de post-fixer après immuno et avant montage des lames.
Bonne chance pour votre marquage
Nathalie