GFP endogène
Bonjour,
Je souhaiterais détecter l'expression de la GFP endogène dans un tissu. Quel est le traitement le mieux adapté pour l'échantillon? Idealement je voudrais la detecter directement sans passer par un immunomarquage.
Si toutefois , l'immunomarquage était inévitable, la GFP se detecte-t-elle en paraffine?
Bien cordialement
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Bonjour Anthony,
La GFP endogène se détecte en coupe paraffine si le signal endogène est suffisamment fort (tout dépend du niveau d'expression) et si tu ne fais qu'un déparaffinage et contre-coloration DAPI. Si tu veux faire un double marquage (GFP + autre cible), dans ce cas il te faudra amplifier le signal avec un Ac anti-GFP. Au labo, on fait pas mal d'IHC GFP sur coupe paraffine, çà a l'intérêt de visualiser la structure histologique et d'amplifier le signal.
J'aurai tendance à te conseiller de faire les 2 préparations : cryo/paraffine pour comparer l'intensité de ton signal et sélectionner la meilleure méthode.
Bonne journée,