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Mise en évidence et quantification du collagène de type 1 sur des coupes d'aorte et de cœur de souris

Florian LAURENT

UMR CNRS:uB6282 Biosgéosciences université de Bourgogne
6bd Gabriel 21000 DIJON

L’inflammation des tissus cardiaques peut être créée par des stress venant de différentes sources et se traduit par une activation de l’inflammasome NLRP3, un complexe composé des protéines NLRP3, ASC et Caspase-1. Si cette inflammation est aiguë et sur une longue durée, elle peut provoquer une fibrose des tissus caractérisée entre autres par un épaississement des parois cardiovasculaires avec une accumulation excessive de collagène de différents types. Nous avons voulu comparer la quantité de collagène de type 1 présente dans des aortes et des cœurs de souris sauvage de 4 mois, et celle présente chez des souris du même âge ayant les gènes NLRP3 ou ASC invalidés.
La quantité de collagène de type 1 a été estimée sur des coupes des tissus cardiovasculaire colorées au Rouge Sirius selon une technique standard et observées par microscopie optique avec polarisation. Après avoir vérifié que l’épaisseur de la coupe ainsi que l’angle de polarisation étaient optimaux, nous avons pu traiter avec le logiciel ImageJ et une macro, le nombre de pixels positifs sur chaque coupe. Cette technique nous a permis de mesurer des différences selon le fond génétique des souris et selon le tissu observé

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